24 de mar. de 2020

Efeito do sombreamento em parâmetros fisiológicos e produção embrionária in vitro de novilhas Nelore tropicais adaptadas em sistemas integrados de cultivo, gado e floresta

Leite da Silva, W.A., Poehland, R., Carvalho de Oliveira, C. et al.
O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do aumento da oferta de sombra em sistemas integrados de lavoura-pecuária-floresta no desenvolvimento embrionário in vitro e parâmetros fisiológicos relacionados à resposta ao estresse em novilhas Nelore ( Bos indicus ). Para o estudo, os animais ( n  = 16) foram divididos aleatoriamente em dois grupos e mantidos em áreas com diferentes sistemas de arborização, o sistema integrado lavoura-pecuária-floresta (ICLF) e o sistema integrado lavoura-pecuária (ICL). O microclima do sistema ICLF proporcionou melhores condições de conforto que o ICL. Não foram verificadas diferenças de frequência respiratória, temperatura retal, cortisol, T3, T4, qualidade de oócitos e taxa de clivagem entre os sistemas. Observou-se uma taxa mais alta de blastocistos na ICLF (p menor igual a 0,05). Os resultados demonstram que as novilhas Nelore manejadas na ICLF durante o verão no Centro-Oeste do Brasil apresentaram maior produção de embriões in vitro, sem alterações típicas em seus parâmetros fisiológicos. Os resultados observados no presente estudo indicam que as fêmeas de zebu são capazes de responder satisfatoriamente às intensas condições de calor; no entanto, acreditamos que o longo período a que esses animais são expostos a essas condições interfere na competência oocitária e no desenvolvimento embrionário.
Introdução
O ambiente em que os animais vivem tem efeitos importantes nas condições de bem-estar dos animais e pode afetar o desempenho produtivo e reprodutivo dos animais. O desempenho satisfatório de um animal depende de uma faixa de temperatura chamada zona de conforto térmico (TCZ), que corresponde aos limites de temperatura nos quais o animal está em homeostase, sem o uso de dispositivos termorregulatórios (Pereira 2005 ). Quando a temperatura ambiente atinge temperaturas críticas superiores a TCZ, a eficiência dos processos de perda de calor é reduzida e o animal entra em estresse por calor (SH) (Silanikove 2000 ), o que leva a uma conseqüente ativação dos mecanismos de termoregulação (Rodrigues et al. 2010) Como respostas, são observadas alterações no comportamento animal, temperatura corporal, frequência respiratória, frequência cardíaca e taxa de sudorese (Paranhos da Costa 2004 ), bem como alterações na atividade adrenal e na resposta imune (Geraldo et al. 2012 ), Macedo e Macedo. Zúccari 2012 ). Redução do ganho de peso (Navarini et al. 2009 ), consumo de alimentos (Geraldo et al. 2012 ) e, consequentemente, uma redução no desempenho reprodutivo também foram relatados (Lima et al. 2013 ). Na reprodução, o HS afeta o desenvolvimento folicular e a qualidade dos oócitos (Roth et al. 2001 ), interferindo desde os estágios iniciais até o final da maturação (Paula-Lopes et al. 2012 ), bem como o número e a qualidade dos embriões produzidos in vitro (Torres-Junior et al. 2008 ). Como consequência dos distúrbios mencionados, a taxa de gravidez também é afetada negativamente.
O sombreamento diminui a incidência de radiação no animal; beneficia o conforto térmico e favorece a homeotermia (Geraldo et al. 2012 ). Segundo Silanikove ( 2000 ), o sombreamento bem projetado reduz a carga total de calor em 30 a 50%. Os benefícios da sombra são mais evidentes no Bos taurus , mas efeitos positivos de sombra já foram observados no Bos indicus (Navarini et al. 2009 ). Embora o efeito positivo do sombreamento seja conhecido, mudanças importantes no manejo de bovinos de corte no Brasil não foram observadas ao longo dos anos. O sistema ICLF, inicialmente projetado para a recuperação de solos e pastagens degradados, foi destacado por melhorar a conversão alimentar, o ganho de peso e o microclima, reduzir o calor através das árvores e contribuir para a sustentabilidade da pecuária nos trópicos com efeito direto sobre bem-estar e conforto térmico (Broom et al. 2013). Faltam informações sobre a variação no comportamento e no desempenho reprodutivo do gado, especialmente o zebu, em relação à disponibilidade ou distribuição de sombra nas áreas onde os animais pastam, por exemplo, usando o sistema integrado de lavoura-pecuária (ICLF). O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do aumento da oferta de tonalidade na ICLF no desenvolvimento embrionário in vitro e parâmetros fisiológicos relacionados à resposta ao estresse de doadoras da Nelore.
Materiais e métodos
O experimento foi realizado na Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, EMBRAPA bovinos de corte, localizada no município de Campo Grande, MS (20 ° 27 'S, 54 ° 37' W e 530 m de altitude), na transição entre mesotérmica úmida clima sem seca e tropical úmido, com estação chuvosa no verão e seca no inverno. A estação chuvosa geralmente ocorre entre outubro e março. A pluviosidade média anual é 1225 mm (Gemtec 2016 ).
Áreas experimentais
O delineamento experimental foi inteiramente casualizado. Duas áreas experimentais foram utilizadas, como descrito anteriormente por Oliveira et al. ( 2014 ) (fig.  1 ). A área 1 foi caracterizada pelo sistema integrado lavoura-pecuária-floresta (ICLF), com 6 ha divididos em 4 piquetes, com uma densidade de 227 árvores ha -1, dispostas em fileiras de eucaliptos ( Eucalyptus grandis x urophylla , clone H13) com distância de 22 m entre linhas. A área 2 foi caracterizada por pastagem com reflorestamento nativo de pecuária integrada (ICL) com 6 ha divididos em 4 piquetes e presença de 5 árvores ha -1 . Árvores nativas da savana brasileira, Cambará ( Gochnatia polymorpha Less .) E Cumbaru (Dipteryx alata Vog ) estavam presentes. Ambas as áreas possuíam Brachiaria brizantha cv. Piatã.

 A quantidade de sombra em cada área foi calculada de acordo com a metodologia utilizada por Silva ( 2006 ) e Cipriani et al. ( 2015 ). Foram medidas a altura da árvore, a altura do caule, o raio da coroa e o tipo de coroa (lentiforme, cilíndrico, cônico ou elioide) e, a partir dessas medidas, as projeções de sombra de cada árvore foram estimadas em cada área.
Animais
As fêmeas nelore (n  = 16) foram divididas em 2 grupos, oito animais por área experimental. Os animais tinham entre 22 e 24 meses de idade e tinham uma pontuação corporal de 2,5 a 3,5 (Ferguson et al. 1994 ), com peso médio de 348,5 (± 41,9). O sistema de pastejo utilizado foi contínuo. Os animais tiveram acesso à água e sal mineral ad libitum. Todos os doadores foram submetidos a três sessões de aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU) para coletar complexos cumulus-oócitos (COCs) uma vez por mês para a produção de embriões in vitro de dezembro de 2015 a fevereiro de 2016. As novilhas foram manejadas nas mesmas áreas desde o desmame.
Monitoramento microclimático
As características microclimáticas em ambas as áreas foram determinadas em dezembro de 2015, janeiro e fevereiro de 2016, das 8:00 às 16:00 (hora local, GMT 04:00), divididas em 8-10, 11-13 e 14 –16 h, 4 dias por mês, de acordo com a metodologia de Karvatte et al. ( 2016 ). Para a medição da temperatura do globo preto (° C), a metodologia proposta por Coelho et al. ( 2013 ), adotado por meio de termo-higrômetro digital com registrador de dados (modelo Perceptec1020, Perceptec Soluções e Tecnologia Ltda., São Paulo, Brasil) inserido em bóias plásticas (PVC) de 0,15 m de diâmetro, pintadas de preto fosco (Fig. 2a
Para a determinação da temperatura (° C) e umidade do ar (%), foi utilizado termômetro digital com data loggers (marca Instrutherm, modelo HT-500) para medir bolbo seco e ponto de orvalho (Fig. 2a), inserido no tubos de PVC perfurados (Fig. 2b ) (Trumbo et al. 2012).
As condições do microclima foram acompanhadas por dois dispositivos localizados em cada área. Os dispositivos foram colocados em pleno sol e sob a sombra projetada, a dois metros do tronco das árvores, 1,3 m acima do solo (na tentativa de simular a altura das costas de um jovem bovino). O índice de umidade globo preto (BGHI) foi calculado de acordo com Buffington et al. ( 1981 ): BGHI = Tgn + 0,36.tpo + 41,5, onde Tgn = temperatura do globo preto em ° C e Tpo = temperatura do ponto de orvalho em ° C.
Coleções e avaliações
O peso da novilha foi medido a cada 30 dias, após 12 horas de retirada de água e ração.
Para PIV, todos os reagentes usados ​​para a preparação do meio eram da Sigma®.
Para redução dos movimentos peristálticos e menor desconforto do animal, foram injetados 5 ml de uma combinação de lidocaína a 2% (Person®) e acepromazina a 1% (Vetnil®) no espaço epidural. Para a aspiração dos folículos, um ultrassom (Aquila PRO®, Pie Medical, acoplado ao transdutor microconvexo de 8 MHz) conectado a uma mangueira de silicone com 2 mm de diâmetro interno e 80 cm de comprimento e agulhas hipodérmicas descartáveis ​​20G (50 mm × 9 mm; Terumo®, Bio Brazil) foi utilizado. A pressão de vácuo foi de 80 mmHg, mantida com uma bomba de sucção (BV-003D WTA, Brasil). O meio de aspiração consistiu em solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco (DPBS) mais 20.000 UI / L de heparina de sódio, mantida a 30 ° C durante a aspiração. Os AOCs recuperados foram rastreados e classificados imediatamente após a sessão do OPU. Os AOCs aspirados foram levados ao laboratório em meio de maturação na incubadora de transporte LABMIX (WTA, Brasil). Os AOCs recuperados foram classificados de acordo com a aparência e distribuição das células cumulus e uniformidade citoplasmática (Stojkovic et al. 2001 ). Os COCs selecionados de todos os doadores de cada grupo foram misturados para minimizar o efeito do doador e amadureceram por 24 h em gotas de 100 μl de meio de maturação (TCM199 com sais de Earls, soro bovino fetal 5% v / v, 01 mE / ml LH 200 mM  L-glutamina, 0,01 mg / ml de estreptomicina, 10 U / ml de penicilina) em óleo mineral. Após 24 h de maturação, os COCs foram lavados (1x) e transferidos para o meio de fertilização (suplementado com heparina, TALP e BSA 6 mg / ml). Sêmen criopreservado de um único touro Nelore foi utilizado para a produção de embriões in vitro. Os espermatozóides foram separados por método de Percoll e inseminao a dose foi de 1 x 10 6 esperma / mL. COCs e espermatozóides foram co-incubados por 22 h. Após a lavagem, os zigotos foram transferidos para 100 ul SOF sob óleo mineral, durante 7 dias (38,5 ° C e 5% CO 2 em ar). A taxa de clivagem foi determinada no dia 3 e a taxa de blastocisto no dia 7. Antes das sessões de OPU, foram coletadas amostras de sangue para analisar as concentrações séricas de hormônios (cortisol, hormônios tireoidianos (triiodotironina / T3 e tiroxina / T4)). Eles foram determinados por radioimunoensaio (RIA) em fase sólida, em laboratório credenciado, utilizando kits comerciais específicos (kit ELISA) para cada hormônio.
A frequência respiratória foi medida contando os movimentos / minuto do flanco direito dos animais por 15 s, que foram multiplicados por quatro. A temperatura retal foi medida usando um termômetro veterinário digital. A temperatura corporal superficial da região da garupa, denominada temperatura da pele, foi medida usando um termômetro infravermelho. Todos esses parâmetros foram medidos imediatamente antes da OPU.
Análise estatística
A análise estatística foi realizada pelo PROC GLIMIX (SAS® 2002). Para cada grupo experimental, a análise foi realizada considerando os efeitos fixos, grupo e tratamento, sobre as variáveis ​​reprodutivas: qualidade dos ovócitos, taxa de clivagem; parâmetros hormonais: nível sérico de cortisol, T3 e T4; e parâmetros fisiológicos: temperatura retal, frequência respiratória e temperatura da pele. Os gráficos foram criados usando o GraphPad Prism versão 7®.
Resultados
O peso inicial médio dos animais foi de 319,38 (± 29,2) kg para o ICLF e 362 (± 14) kg para o ICL ( p  > 0,05), e o peso no final do experimento foi de 349 (± 30,2) e 376 (± 15,21) kg ( p  > 0,05), respectivamente. A projeção da sombra foi calculada e o ICLF ofereceu 8189,4 m 2  ha- 1 e ICL 195,7 m 2  ha- 1 . As temperaturas mais altas durante os 3 meses do experimento (29,4 a 38 ° C) foram observadas entre 10 e 14 h em ambas as áreas ao sol (Fig.  3 ). Nos dois grupos, a sombra pode reduzir a temperatura em até 3 ° C durante os períodos mais quentes. A umidade relativa do ar variou entre 72 e 82,7% ao longo do experimento (Fig.  4 ). O índice pluviométrico registrado em dezembro, janeiro e fevereiro (período de coleta de dados) foi de 139,8 mm, 344,8 mm e 152 mm, respectivamente. A alta umidade de
janeiro deve ser destacada, o que poderia explicar as médias mais baixas de temperatura.

As estações microclimáticas registraram maior umidade na sombra, tanto no ICL quanto no ICLF. Os menores valores de umidade relativa do ar foram registrados às 13:00, ao sol, com taxas de 69,9 e 69,5% para ICLF e ICL, respectivamente. A Tabela 1 mostra a média mensal do índice de temperatura e umidade do globo preto (BGHI) no período experimental. Houve diferença no BGTHI entre os tratamentos ( p  = 0,0349), onde o ICL apresentou maior índice. Janeiro apresentou taxas mais baixas de BGHI, devido ao maior índice de chuvas. Fevereiro destacou-se com maiores valores de BGHI, principalmente ao sol, na hora mais quente do dia (13:00), quando os maiores valores de BGHI foram registrados ao longo do experimento, 89,3 no ICLF e 90,4 no ICL. Por outro lado, enfatiza-se que uma única vez durante o período experimental o BGHI foi inferior a 74, e isso ocorreu em área sombreada às 8:00. 
Tabela 1 Média mensal do índice de temperatura e umidade do globo preto (BGHI), ao sol e à sombra, nos sistemas integrado lavoura-pecuária-floresta e pecuária integrada (ICLF e ICL) entre dezembro e fevereiro
Nenhum dos parâmetros fisiológicos medidos foi superior aos padrões fisiológicos das espécies (Rosenberger 1983 ) (Tabela 2 ). Não houve diferença entre os parâmetros entre os sistemas de sombreamento.
Tabela 2 Parâmetros fisiológicos e hormonais de novilhas Nelore manejadas em sistemas integrados de lavoura-pecuária-floresta e sistemas integrados de lavoura-pecuária (ICLF e ICL) entre dezembro e fevereiro
Não foi observada diferença estatística na qualidade dos ovócitos e na taxa de clivagem; no entanto, uma taxa mais alta de blastocistos ( P  = 0,01) foi observada na ICLF (Tabela 3 ).
Tabela 3 Qualidade dos ovócitos e produção embrionária de novilhas Nelore gerenciadas em sistemas integrados de lavoura-pecuária-floresta e sistemas integrados de lavoura-pecuária (ICLF e ICL) entre dezembro e fevereiro
Discussão
Foi relatado que o sombreamento reduz a carga de calor radiante nos animais. Como conseqüência, também reduz o calor corporal e facilita a termorregulação, favorecendo o bem-estar e a produtividade dos animais (Salla et al. 2009 ). Foi relatada uma redução de 30% na incidência de carga térmica no pastejo rotativo (Paranhos da Costa 2004 ), tornando o ambiente mais confortável e favorável ao pastejo. No presente estudo, a ICLF ofereceu cerca de 8 vezes mais sombra (8189,4 m 2  ha -1 ) que a ICL (195,7 m 2  ha -1 ) e, como esperado, a sombra foi eficiente na melhoria das condições microclimáticas que poderiam ser demonstradas pela menor BGHI na ICLF. O Serviço Nacional de Meteorologia (1976) delimitou valores de BGHI até 74 como uma situação confortável para o gado, valores acima do que é considerado estresse térmico. No entanto, a necessidade de ajustes dos índices de conforto térmico (BGHI e THI) para o zebu e seus cruzamentos tem sido discutida nos últimos anos (Fialho et al. 2018) No presente estudo, os maiores valores de BGHI foram verificados entre 11:00 e 13:00. Ao longo do período experimental, uma única vez, o BGHI, foi inferior a 74, e isso ocorreu na sombra às 8:00. Às 13:00, em nenhuma circunstância o BGHI estava abaixo de 76 e, se desconsiderarmos janeiro, devido à alta umidade (precipitação acima do normal para este período), esses valores não foram inferiores a 88 no sol e 81 na sombra, indicando a calor intenso a que esses animais estavam submetidos. Buscando melhor conforto térmico, um estudo foi realizado há alguns anos na mesma região, comparando o ICLF com diferentes densidades de eucalipto e sistemas de árvores nativas dispersas (Karvatte et al. 2016) Os autores verificaram que o eucalipto com espaçamento de 22 m entre as linhas promoveu melhor conforto (BGHI) do que sistemas com árvores dispersas e o ICLF com espaçamento de 14 m entre as linhas (alta densidade de árvores). Esses resultados mostraram que há um limite no fornecimento de sombra. É possível que a alta densidade de árvores tenha proporcionado um aumento excessivo de umidade, tornando o ambiente desconfortável. Portanto, decidimos realizar nossa investigação na ICLF com espaçamento entre árvores de 22 m entre linhas. De maneira geral, ao longo do experimento, a umidade foi superior a 69% (± 3,5), ou seja, superior ao limite superior de conforto, uma vez que ambientes com umidade relativa entre 60 e 70% são considerados confortáveis ​​(Baêta e Souza 2010), mas são esperadas alta umidade e altas temperaturas durante o verão (estação das chuvas) na região estudada; portanto, é importante procurar sistemas de manejo que melhorem o bem-estar animal e, consequentemente, a produção animal. Oliveira et al. ( 2014 ) mostraram que o ICLF com maior densidade de árvores (357 árvores ha- 1 ) proporciona menor ganho de peso por hectare de novilhas Nelore quando comparado com sistemas com densidades mais baixas, 227 árvores ha- 1 e 5 árvores ha- 1 , o que teve ganho de peso semelhante por hectare no verão. Esses resultados mostraram que o ICLF com densidade intermediária de árvores é uma boa maneira de a pecuária proporcionar bem-estar animal, sem diminuir a produção animal por hectare e diversificar suas fontes de receita. Sabe-se que mamíferos submetidos ao estresse térmico aumentam a temperatura retal (Hansen 2004 ; Titto et al. 2011 ) e a freqüência respiratória (Medeiros e Vieira 1997 ), tornando ambos os parâmetros elegíveis para avaliar o estresse térmico em bovinos (Ferreira et al. 2006 ). . A frequência respiratória é geralmente o primeiro parâmetro fisiológico a aumentar em situações de estresse térmico, pois é um importante mecanismo fisiológico para dissipação de calor (Paranhos da Costa 2004). No entanto, cerca de 70-85% da perda máxima de calor ocorre por evaporação e é devido à transpiração com o restante devido à respiração. À medida que a temperatura do ar se aproxima da temperatura da pele, a evaporação se torna a principal via de troca de calor com o meio ambiente (Hansen 2004 ). Essa situação foi observada em nosso estudo, uma vez que a temperatura média do ar durante o experimento foi de 32 ° C, no ICLF e no ICL. , e a temperatura da pele foi de 30,6 ° C e 31,4 ° C ( p  > 0,05), em ICLF e ICL, respectivamente. Melo-Costa et al. ( 2018 ) mostraram que os custos energéticos da termorregulação parecem ser mais baixos nos animais Nelore quando comparados com outras raças criadas em ambientes tropicais. A produção de calor metabólico, a frequência respiratória e a evaporação cutânea foram estáveis ​​na faixa de temperatura do ar de 24 a 35 ° C, semelhante a este estudo. No presente estudo, nunca foi observado que a frequência respiratória e a temperatura retal excedam o limite de referência para as espécies (Vasconcelos e Demetrio 2011) Considerando as condições experimentais atuais, embora tenham sido observados BGHIs de até 90,4, não podemos confirmar que os animais estavam sob estresse térmico. No outro local, é importante considerar que as medidas fisiológicas foram realizadas imediatamente antes da OPU e, nesse período, as novilhas estavam juntas no curral nas mesmas condições. Cada novilha intercalada de OPU de ICLF e ICL e todos os procedimentos (coleta de animais até a última OPU) ocorreram em torno de 3 h. É possível que a temperatura da pele e do reto, bem como a freqüência respiratória, tenham sido ajustadas às condições microclimáticas do curral durante esse período e, portanto, não pudemos ver nenhuma diferença. Seria mais apropriado que as medidas fossem realizadas sem a necessidade de conter os animais e sem perturbar seu estado natural. Recentemente, foi demonstrado que as novilhas Nelore criadas em ICLF e ICL têm temperatura retal normal e semelhante; no entanto, a temperatura vaginal aumentou de acordo com o aumento da BGHI e foi maior em novilhas criadas em LCI (Oliveira et al. 2019 ), mostrando que, apesar da clara adaptação ao calor, as novilhas responderam a mudanças nas condições do ambiente.
As alterações nas concentrações séricas de cortisol foram muito claras após situações estressantes agudas, como o manejo da Nelore no curral (Lima et al. 2017 ) e após o desmame (Chaves et al. 2015 ). Novilhas Black Angus atribuídas a caneta com quatro tratamentos de sombra diferentes por 8 semanas durante o verão mostraram diferentes concentrações séricas de cortisol de acordo com o tratamento de sombra (Brown-Brandl 2018). No entanto, Mormede et al. ( 2007) sugeriram que a reatividade do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) em bovinos, como o ACTH (cortisol), não é um indicador confiável do status do bem-estar animal, devido a muitos resultados controversos. Além disso, os autores discutiram que a dinâmica em processos adaptativos pode determinar fortemente a capacidade de resposta do eixo HPA de bovinos individuais em um determinado momento. Eles acreditam que esse processo pode envolver alterações reversíveis na densidade e sensibilidade dos receptores ACTH e cortisol. No presente estudo, as novilhas nascidas na fazenda foram avaliadas e manejadas nas mesmas condições ambientais (ICL e ICLF) desde o desmame, ou seja, expostas cronicamente às condições microclimáticas diferenciadas pela quantidade de tonalidade. A adaptação a essas condições pode explicar as concentrações semelhantes de cortisol entre os grupos. Os hormônios tireoidianos (TH) são considerados "marcadores" da temperatura corporal. Weitzel et al. ( 2017 ) observaram um declínio acentuado nos níveis de T3 e T4 em vacas leiteiras submetidas ao estresse térmico. Esperávamos mudanças nas concentrações de T3 e T4 em resposta a um melhor conforto térmico na ICLF. No entanto, nem T3 nem T4 alteraram seu nível fisiológico, o que está de acordo com as temperaturas corporais semelhantes observadas nos dois grupos. Em ruminantes, estudos confirmaram que leva um mês para um folículo primordial atingir o estágio pré-ovulatório (Britt 2008 ). Sabe-se que os ovócitos dos folículos pré-antrais estão crescendo e com uma intensa síntese de RNA (Oktem e Urman 2010 ), o que os torna sensíveis às mudanças ambientais. Torres-Junior et al. ( 2008 ) avaliaram os efeitos do estresse térmico em animais zebuínos em uma câmara climática e não observaram efeitos imediatos nas funções reprodutivas, como recrutamento folicular ou padrão de crescimento folicular, mas efeitos deletérios foram observados na dinâmica folicular ovariana e na competência oocitária 112 dias após estresse por calor. Vários estudos demonstraram que o estresse térmico afeta negativamente a taxa de blastocistos (Al-Katanani et al. 2002 ; Ferreira et al. 2008 , Torres-Júnior et al. 2008). No presente estudo, a taxa de blastocistos foi 54,7% ( p  = 0,01) maior no sistema ICLF. Um dos métodos de identificação da competência oocitária é a avaliação de sua capacidade de clivar e se tornar blastocisto. Fialho et al. ( 2018) descobriram que as vacas leiteiras mestiças expostas a alto THI 60 dias antes da sessão de OPU tinham reduzido a qualidade do oócito. No presente estudo, as novilhas estavam no mesmo sistema de manejo desde o desmame, garantindo mais do que um processo inteiro de foliculogênese nas mesmas condições microclimáticas. Não foi possível confirmar o estresse térmico procurando os parâmetros fisiológicos estudados, mas é possível que haja processos celulares e / ou moleculares relacionados à adaptação ao calor que não pudemos acessar em nosso estudo, o que poderia afetar o desenvolvimento embrionário. Por outro lado, sempre que os animais pastavam na mesma grama, não podíamos fornecer informações sobre a influência da qualidade dos alimentos ou da ingestão de alimentos no desenvolvimento embrionário. Gamarra et al. ( 2017 ) avaliaram as diferenças de gramíneas e o desempenho de novilhas Nelore na mesma área utilizada neste experimento. Os autores mostraram que, em comparação com o ICL, o ICLF com densidade intermediária de árvores (o mesmo deste estudo) apresenta rendimento de massa seca de grama e folhas de grama semelhantes no verão, mas menor teor de fibra em detergente neutro e maior teor de proteína bruta, e semelhante ao nosso estudo , não foi observada diferença no ganho de peso do animal entre as áreas. Foi demonstrado que a ingestão de energia e proteínas pode alterar o sistema IGF ovariano e que a concentração de proteínas na dieta pode afetar negativamente a qualidade dos ovócitos (Armstrong et al. 2001 ). Portanto, é importante investigar se as diferenças na composição da grama podem estar relacionadas à qualidade dos oócitos e ao desenvolvimento embrionário em diferentes sistemas integrados. Os resultados observados no presente estudo indicam que as fêmeas de zebu são capazes de responder satisfatoriamente a condições de calor intenso. A maior porcentagem de embriões in vitro obtidos de doadores gerenciados na ICLF não pôde ser explicada após o experimento planejado. Mas acreditamos que: (1) a medição dos parâmetros fisiológicos sem confinamento animal mostraria diferenças entre os sistemas; (2) alterações moleculares relacionadas à adaptação ao alto índice de BGHI podem ocorrer no líquido folicular e no complexo cumulus-oócitos que influenciam a competência oocitária e o desenvolvimento embrionário; e (3) a composição da grama precisa ser analisada e comparada com hormônios e fatores envolvidos no desenvolvimento de oócitos e embriões.
Conclusão
Novilhas Nelore conseguiram manter a homeotermia na BGHI até 90,4, sem apresentar alterações fisiológicas típicas, indicando ser uma raça termotolerante. Novilhas Nelore manejadas em culturas integradas de pecuária-floresta (ICLF) durante o verão no Centro-Oeste do Brasil apresentaram maior produção de embriões in vitro, e acreditamos que o longo período em que esses animais foram expostos a essas condições melhorou a competência oocitária e o desenvolvimento embrionário.
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Financiamento
Financiamento de acesso aberto fornecido pelo Projekt DEAL. Este estudo foi financiado em parte pela Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Código Financeiro 001 da CAPES, - Código 88881.068117 / 2014–01 e pela Fundação para o Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia no Mato Grosso do Sul ( FUNDECT / CNPq N ° 15 / 2014- PRONEM -MS).
Informação sobre o autor
Afiliações
Ciência Animal, Universidade Estadual de Mato Grosso do Sul, Aquidauana, Mato Grosso do Sul, Brasil
Wilian Aparecido Leite da Silva & Fabiana de Andrade Melo-Sterza
Instituto Leibniz de Biologia de Animais de Fazenda, Instituto de Biologia Reprodutiva, Dummerstorf, Alemanha
Ralf Poehland & Fabiana de Andrade Melo-Sterza
Medicina Veterinária, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil
Caroline Carvalho de OliveiraMariane Gabriela Cesar Ribeiro FerreiraRicardo Garcia de AlmeidaGustavo Guerino MacedoEliane Vianna da Costa e SilvaEriklis Nogueira & Fabiana de Andrade Melo-Sterza
Ciência Animal, Universidade Estadual de Londrina, Londrina, Paraná, Brasil
Mirela Brochado Souza Cáceres
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, Bovinos de Corte EMBRAPA, Campo Grande, Brasil
Fabiana Villa Alves
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, EMBRAPA Pantanal, Corumbá, Brasil
Eriklis Nogueira
autor correspondente
Correspondência para Fabiana de Andrade Melo-Sterza.

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